Tava pensando aqui em como ELISA parece coisa de cientista maluco, mas resolvi comprar um kit pra brincar em casa. Primeiro erro que quase cometi? ACHAR QUE O NEGÓCIO É TUDO IGUAL. Peguei o primeiro que vi na net e quase cai no conto.
Primeira treta: escolher o kit
Abre o site e PÁ! Trinta tipos diferentes. ImmunoPure, MaxSorp, SeraCare… quê? Fiquei que nem barata tonta. Aí lembrei de um vídeo que vi: o primeiro erro é não olhar O QUE EXATAMENTE o kit detecta. Tinha uns que pegavam antígeno de rato, outros de galinha, outros de coisa que nem sei pronunciar.
Mergulhei na descrição até achar um parágrafo que dizia: “Para detecção de IgG humana”. PERAÍ. No meu projeto eu queria IgM! Tudo errado. Se eu não lesse com calma, tinha comprado tijolo caro. Fiquei meia hora comparando letrinha miúda com uma lupa virtual.
Segundo vacilo: tipo de placa
Quando achei o kit certo, veio outra bomba. Tinha duas opções:
- Placa de 96 poços planinhos
- Placa de 96 poços FUNDOS
Não fazia ideia da diferença. Até que li comentário de um cara que falou: “Se for fazer só ELISA básico, pega a plana. Fundo é pra experimento complexo”. Eu? Só queria ver se minha amostra reagia! Plana que vou usar pra não gastar solvente à toa.
Chegou em casa ontem. Abri a caixa e… calma, antes de sair pipetando tudo:
- Li o manual INTEIRO (até a parte chata em letras 6)
- Separei TUDO que precisava antes: micropipeta, ponteiras, timer
- Preparei a solução de lavagem DO JEITO que mandava
O resultado? Fiz o teste com soro velho meu de quando tive dengue. Deu POSITIVO! A placa ficou azulzinha nos poços certos. Mas quase cai nos dois erros bestas: kit errado e placa errada. Quem avisa amigo é!